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Ce tableau met en scène un sujet issu des Métamorphoses d'Ovide : l'histoire tragique des deux amants Pyrame et Thisbé. Pyrame et Thisbé s'aiment en secret, contre l'avis de leurs parents. Un beau jour, ils décident de se donner rendez-vous au pied d'un grand mûrier, végétal qui à l'époque, portait des fruits blancs. Thisbé, arrivée la première, prend peur à la vue d'une lionne surgie de la forêt. Elle s'enfuit en laissant tomber son foulard, que la lionne lacère de dépit. Pyrame, arrivé sur ces entrefaites, découvre ce foulard souillé de sang : persuadé que Thisbé s'est faite dévorer, il se donne la mort avec son épée. Le peintre représente Thisbé, sortie de sa grotte, folle de douleur à la vue de son amant agonisant. Quelques instants plus tard, elle se donnera la mort : son sang éclaboussera les mûres, qui, de blanches, en porteront à jamais la couleur.